王曉雯 李琳琳 木胡牙提 王雪飛 堵年生

摘要目的:研究肉歡蓉總試 ( GCS)對(duì)小鼠組織的抗氧化作用。方法:采用鄰苯三酚自氧化、硫代巴比妥酸;TBA)和熒光法.分別測(cè)定小鼠心、肝、腦、腎組織中SOD活性、MDA及脂褐質(zhì)含量。結(jié)果:GCS(125mg

關(guān)鍵詞：肉蓯蓉總甙 超氧化物歧化酶 丙二醛  脂褐質(zhì)  抗氧化

肉從蓉Cistanch.e salsa(c. A. IVIey.)G.Beck.有補(bǔ)中益氣，益精，壯陽之功效，在歷代抗老延年古方中出現(xiàn)的機(jī)率僅次于人參。近代藥理研究，肉從蓉有增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[1]，促進(jìn)記憶，提高智能[2]，抗衰老[3]等作用。肉從蓉粗制劑顯著降低心肌脂褐質(zhì)含量[3]。本文主要研究肉灰蓉總貳( GcS)對(duì)小鼠心、肝、腦、腎組織的抗氧化作用及脂褐質(zhì)含量的影響。

1材料

1.1藥材及試劑肉從蓉總貳由新疆醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系植化室提取并鑒定[4]。鄰苯三酚。遵義

市第二化工廠生產(chǎn);硫代巴比妥酸，上海試劑二廠生產(chǎn);奎寧，上海試劑二廠;1, 1, 3, 3-四乙氧基烷(TEP)?？捡R斯亮藍(lán)均為Sigma公司產(chǎn)品。

1.}動(dòng)物VIH種小鼠，由新疆地方病研究所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。

2方法與結(jié)果

Z.1  GCS對(duì)小鼠組織中5QD活性及MDA含量的影響選5月齡i}1IH健康小鼠40只，體重(33.5 1 2)g，雌雄兼用，依體重均衡隨機(jī)分成生理鹽水對(duì)照組〔NS)和不同劑量GCS組(62 .5, 125* 250mg·kg-1·d-1，ig )，連續(xù)30d;

另設(shè)1月齡NIH幼年小鼠10只，體重(15.2士1.5)g,ig同體積NS，每天1次，連續(xù)30d，各組于末次給藥后1.5h，脫頸椎處死，開胸腹，立即取出心、肝、腦、腎組織，用冷凍NS沖洗，組織稱重，研磨，制備組織勻漿，3000r " min-離心30min-1，取其上清液備測(cè)，采用鄰苯三酚自氧化法測(cè)定組織SOD活性[5].用TBA顯色法測(cè)組織MDA含量[6].用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定組織蛋白[7]。

結(jié)果表明5’月齡NS組小鼠心、肝組織中SOD活性明顯低于1月齡NS組，各組織MDA含量明顯高于1月齡NS組，GCS組與5月齡NS組比較，250mg " kg一‘時(shí)顯著提高心、肝組織中”D活性，接近1月齡組;125, 250mg " kg一’組均降低心、肝組織中MDA含量，接近1月齡組:125, 250mg " kg”組顯著提高腦、腎組織中SOD活性，并顯著降低MDA含量，接近1月齡組(表1}

a . z Gcs對(duì)小鼠組織脂褐質(zhì)含量的影響選健康5月齡NIH種小鼠as只，體重(3211.5)g，雌雄兼用，依體重均衡分成4組，:VS對(duì)照組和不同劑量GCS組(62. 5, 125, 250mg " kg一‘·d一  1， ig)，連續(xù)30d，另設(shè)1月齡NIH種小鼠la只，體重〔151 1. 5)g,啥同體積NS，每天1次，連續(xù)Sad，各組于末次給藥后1.5h，脫頸椎處死，分別取心、肝、腦、腎組織，用濾紙吸干水分，稱取各組織0.2g，按Sohal}$]方法，將組織用氯仿.甲醇X2:1)混合液分次制成8m1勻漿，置40℃水浴溫育Smin, 3000r " min一‘離心14min,取氯仿層于島津RF-540型熒光分光光度儀，激發(fā)波長352 . 6nm,發(fā)射波長451. Lnm,測(cè)熒光強(qiáng)度，按硫酸奎寧卜g"ml-‘的熒光強(qiáng)度為I00單位，計(jì)算每克濕組織的熒光計(jì)數(shù)單位，以u"g一‘表示。

結(jié)果見表2，各組均與5月齡小鼠IV5組比較，1月齡IBS組，肝、腦組織中脂褐質(zhì)含量明顯低于5月齡NS組。GC5 250mg " kg‘組明顯降低心臟組織中脂褐質(zhì)含量，125.250mg " kg-1時(shí)均明顯降低肝、腎組織中脂褐質(zhì)含量，250mg kg一‘時(shí)降低更明顯。

3討論

衰老的自由基學(xué)說認(rèn)為，隨著增齡，體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與消除失平衡，使自由基清除酶SOD活性降低，使生物膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化，破壞了生物大分子的結(jié)構(gòu)和功能，使體內(nèi)主要臟器心、肝、腦、腎等受損。另外，脂褐質(zhì)是自由基氧化作用的產(chǎn)物，其在組織內(nèi)含量與脂質(zhì)過氧化反應(yīng)呈正相關(guān)，是衰老的一項(xiàng)指標(biāo)。因此，維持體內(nèi)自由基的穩(wěn)態(tài)和平衡，消除有害的自由基反應(yīng)，中斷脂質(zhì)過氧化，減少脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，對(duì)延緩衰老十分重要，這有賴于提高自由基清除酶系統(tǒng)活性。目前研究認(rèn)為多數(shù)中藥的抗衰老作用機(jī)制可能與其抗氧化作用有關(guān)[9]。本文研究發(fā)現(xiàn)肉從蓉中的有效成分肉從蓉總貳能明顯提高5月齡小鼠心、肝、腦、腎組織中自由基清除酶SOD活性，對(duì)腦、腎組織作用敏感。并降低上述組織中11}iDA及脂褐質(zhì)含量。提示GCS具有抗氧化作用及抗衰老作用。